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Western Blot快速封閉液

時間:2020-04-26 13:54:09 瀏覽:

貨號:Cat.No:P30500    Size: 500 ml


產品介紹

NcmBlot blocking buffer(快速封閉液)是一種即用型,高效快速應用于 Western Blot 等實驗的封閉液。封閉 時間僅需 10 分鐘,效果優于脫脂奶粉、BSA、酪蛋白等傳統封閉液,獲得更高的信號,更低的背景值,信噪 比高。該試劑不含有哺乳動物來源的蛋白成分,避免與抗體發生交叉反應,適用于磷酸化的抗體,但不可用于生物素標記的抗體。


產品特色 ?

  • 即用型封閉液,無需配制 ?
  • 封閉時間短,僅需 10 分鐘 ?
  • 背景低,信噪比高,優于常規奶粉等封閉的效果 ?
  • 不含哺乳動物來源的蛋白,適用于磷酸化的抗體

操作步驟

1. 完成轉膜后,將膜移入到平皿或者其他適合的容器中(可以不洗滌膜)。

2. 根據膜的大小,加入適量體積的 NcmBlot Blocking Buffer 封閉液,需完全浸沒覆蓋膜,對于 7.5x 8cm 的膜推薦使用量 5-10ml。

3. 置于水平搖床上,室溫條件下振蕩孵育 10 分鐘。

4. 取出封閉完成的膜,用洗滌液沖洗蛋白膜 2-3 次,即可用于一抗孵育等后續 western blot 實驗。


保存條件

4℃保存,冰袋運輸,至少 1 年有效;


注意事項

1. 通常用于 PVDF 膜或 NC 膜的封閉時間為 10 分鐘。對于背景低的抗體,可以縮短到 5 分鐘,而對于一些背景 非常高的抗體,可以嘗試將封閉時間延長為 30-60 分鐘。

2. 沒有任何一種封閉液是適用于所有實驗體系的,因此對于一些特殊的實驗或抗體,可能需要具體情況考慮使 用其它更合適的封閉液,比如奶粉、BSA 等封閉試劑。

3. 信號弱或者無信號:有可能是上樣量不足;轉膜效率低;抗體效價低,特異性差等原因造成,需要根據實驗 情況進行調整

4. 背景高:有可能是抗體使用量過多;蛋白膜洗滌時間不足;抗體和封閉液發生交叉反應;試劑或儀器設備被 污染等原因造成,需要根據實驗具體情況進行調整。

5. 本產品僅限于科研使用,實驗時請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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